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納米金
氯金酸通過(guò)還原法制備出的顆粒
納米金即指金的微小顆粒，其直徑在1～100nm，具有高電子密度、介電特性和催化作用，能與多種生物大分子結(jié)合，且不影響其生物活性。由氯金酸通過(guò)還原法可以方便地制備各種不同粒徑的納米金，其顏色依直徑大小而呈紅色至紫色。
基本信息
| 中文名 | |
| 外文名 | AuNPs |
| 類(lèi)別 | 金的微小顆粒 |
| 功效 | 高電子密度、介電特性和催化 |
| 直徑 | 1～100nm， |
發(fā)展歷史
自從16世紀(jì)歐洲現(xiàn)代化學(xué)的奠基人、杰出的醫(yī)師、化學(xué)家Paracelsus制備出“飲用金”用來(lái)治療精神類(lèi)疾病以來(lái)，納米金就開(kāi)始登上了科學(xué)的舞臺(tái)。1857年英國(guó)科學(xué)家法拉第在研究道爾頓的理論時(shí)，利用氯化金還原出含納米金的溶液，發(fā)現(xiàn)在其中加入少量電解質(zhì)后，可使溶液由紅寶石色變?yōu)樗{(lán)色，并最終凝集為無(wú)色，而加入明膠等大分子物質(zhì)便可阻止這種變化。盡管當(dāng)時(shí)并不知道原因，但他的發(fā)現(xiàn)為納米金的應(yīng)用奠定了科學(xué)基礎(chǔ)。1885年納米金溶液在美國(guó)常作為治療酗酒的主要成分；1890年Koch醫(yī)生發(fā)現(xiàn)結(jié)核桿菌不能夠在金的表面存活；1890年納米金被用來(lái)治療關(guān)節(jié)炎；1935年芝加哥外科專(zhuān)家Edward等人發(fā)現(xiàn)納米金溶液能有效的減輕患者病痛，強(qiáng)健體質(zhì)。1939年Kausche和Ruska用電子顯微鏡觀察金顆粒標(biāo)記的煙草花葉病毒，呈高電子密度細(xì)顆粒狀。1971年Faulk和Taylor首次采用免疫金染色(immunogold staining，IGS)將兔抗沙門(mén)氏菌抗血清與納米金顆粒結(jié)合，用直接免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測(cè)沙門(mén)氏菌的表面抗原，開(kāi)創(chuàng)了納米金免疫標(biāo)記技術(shù)。
檢測(cè)技術(shù)發(fā)展
納米金溶液
作為顯微鏡示蹤物
納米金
應(yīng)用于相溶膠顆粒
均相溶膠顆粒免疫測(cè)定法(sol particle immunoassay， SPIA)是利用免疫學(xué)反應(yīng)時(shí)
金顆粒凝聚導(dǎo)致顏色減退的原理，將納米金與抗體結(jié)合，建立微量凝集試驗(yàn)檢測(cè)相應(yīng)的抗原，如間接血凝一樣，用肉眼可直接觀察到凝集顆粒。已成功地應(yīng)用于PCG的檢測(cè)，直接應(yīng)用分光光度計(jì)進(jìn)行定量分析。
應(yīng)用于流式細(xì)胞儀
應(yīng)用熒光素標(biāo)記的抗體，通過(guò)流式細(xì)胞儀(Flow CytoMeter，F(xiàn)CM)計(jì)數(shù)分析細(xì)胞表面抗原，是免疫學(xué)研究中的重要技術(shù)之一。但由于不同熒光素的光譜相互重疊，區(qū)分不同的標(biāo)記很困難。Boehmer等研究發(fā)現(xiàn)，納米金可以明顯改變紅色激光的散射角，利用納米金標(biāo)記的羊抗鼠Ig抗體應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)，分析不同類(lèi)型細(xì)胞的表面抗原，結(jié)果納米金標(biāo)記的細(xì)胞在波長(zhǎng)632nm時(shí)，90度散射角可放大10倍以上，同時(shí)不影響細(xì)胞活性。而且與熒光素共同標(biāo)記，彼此互不干擾。因此，納米金可作為多參數(shù)細(xì)胞分析和分選的有效標(biāo)記物，分析各類(lèi)細(xì)胞表面標(biāo)志和細(xì)胞內(nèi)含物。
應(yīng)用于斑點(diǎn)免疫
斑點(diǎn)免疫金銀染色法(Dot-IGS，IGSS)是將斑點(diǎn)ELISA與免疫納米金結(jié)合起來(lái)的一種方法。將蛋白質(zhì)抗原直接點(diǎn)樣在硝酸纖維膜上，與特異性抗體反應(yīng)后，再滴加納米金標(biāo)記的第二抗體，結(jié)果在抗原抗體反應(yīng)處發(fā)生金顆粒聚集，形成肉眼可見(jiàn)的紅色斑點(diǎn)，此稱(chēng)為斑點(diǎn)免疫金染色法(Dot-IGS)。此反應(yīng)可通過(guò)銀顯影液增強(qiáng)，即斑點(diǎn)金銀染色法(Dot-IGS/IGSS)。
應(yīng)用于免疫印跡
免疫印跡技術(shù)(immunoblotting，IBT)也稱(chēng)為免疫轉(zhuǎn)印技術(shù)，其原理是根據(jù)各種抗原分子量大小不同，在電泳中行走的速度不同，因而在硝酸纖維素膜上占據(jù)的位置也不同；把含有特異性抗體的血清和這一薄膜反應(yīng)，那么特異性的抗原抗體反應(yīng)就顯色。而納米金免疫印跡技術(shù)相比酶標(biāo)記免疫印跡技術(shù)具有簡(jiǎn)單、快速、具有相當(dāng)高的靈敏度。而且應(yīng)用納米金將硝酸纖維素膜上未反應(yīng)抗體進(jìn)行染色，評(píng)估轉(zhuǎn)膜效率，校正抗原一抗體反應(yīng)的光密度曲線，即可進(jìn)行定量免疫印跡測(cè)定。
應(yīng)用于斑點(diǎn)金
斑點(diǎn)金免疫滲濾測(cè)定法(dot immuno-gold filtration assay，DIGFA)是斑點(diǎn)免疫測(cè)定法(dot immunoboding assay，DIBA)中的一種，是1982年由Hawkes等人在免疫印跡技術(shù)基礎(chǔ)上改良發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)免疫學(xué)新技術(shù)。其原理完全同斑點(diǎn)免疫金染色法，只是在硝酸纖維膜下墊有吸水性強(qiáng)的墊料，即為滲濾裝置。在加抗原(抗體)后，迅速加抗體(抗原)，再加金標(biāo)記第二抗體，由于有滲濾裝置，反應(yīng)很快，在數(shù)分鐘內(nèi)即可顯出顏色反應(yīng)。與斑點(diǎn)免疫滲濾測(cè)定法(d o t immunotietration assay，DIFA)相比，所不同的是免加底物液，直接由紅色膠體金探針顯色，結(jié)果鮮艷，背景更清楚，可以在室溫下保存。該方法已成功地應(yīng)用于人的免疫缺陷病病毒(HI)的檢查和人血清中甲胎蛋白的檢測(cè)。目前使用的有HCG試劑盒，AFP試劑盒，消化道腫瘤篩檢試劑盒。
應(yīng)用于免疫層析
免疫層析法(gold immunochromatography assay， GICA)是將各種反應(yīng)試劑以條帶狀固定在同一試紙條上，待檢標(biāo)本加在試紙條的一端，將一種試劑溶解后，通過(guò)毛細(xì)作用在層析條上滲濾、移行并與膜上另一種試劑接觸，樣品中的待測(cè)物同層析材料上針對(duì)待測(cè)物的受體(如抗原或抗體)發(fā)生特異性免疫反應(yīng)。層析過(guò)程中免疫復(fù)合物被截留、聚集在層析材料的一定區(qū)域(檢測(cè)帶)，通過(guò)可目測(cè)的納米金標(biāo)記物得到直觀的顯色結(jié)果。而游離標(biāo)記物則越過(guò)檢測(cè)帶，達(dá)到與結(jié)合標(biāo)記物自動(dòng)分離之目的。GICA特點(diǎn)是單一試劑，一步操作，全部試劑可在室溫長(zhǎng)期保存。這種新的方法將納米金免疫檢測(cè)試驗(yàn)推進(jìn)到～個(gè)嶄新的階段。
生物傳感器
生物芯片
生物芯片是以膜、玻璃、硅等固相介質(zhì)為載體，其最大的優(yōu)點(diǎn)在于高通量、并行化、微型化。一次實(shí)驗(yàn)可同時(shí)檢測(cè)多種或多份生物樣品。生物芯片包括基因芯片、蛋白質(zhì)芯片、細(xì)胞芯片、組織芯片。目前，生物芯片用于食品安全檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用主要包括農(nóng)藥、獸藥殘留檢測(cè)，食品微生物檢測(cè)、動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物植物檢測(cè)等。2002年P(guān)ark等在《Science》雜志上介紹了一種以納米金為探針的基于電荷檢測(cè)的新型基因芯片，該芯片具有非常好的靈敏度及特異性，可以在十萬(wàn)分之一比率中檢測(cè)出單堿基突變的基因片段。
檢測(cè)中的應(yīng)用
目前食品檢測(cè)分析一般采用化學(xué)分析法(CA)、薄層層析法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)，但需要繁瑣、耗時(shí)的前處理，樣品損失也較大。相對(duì)于靈敏度較低的CA和TLC方法，GC、HPLC的靈敏度較高，但操作技術(shù)要求高、儀器昂貴，并不適合現(xiàn)場(chǎng)快速測(cè)定和普及，而以納米金為免疫標(biāo)記物的檢測(cè)技術(shù)正彌補(bǔ)了這些技術(shù)的缺點(diǎn)，在現(xiàn)代食品分析檢測(cè)中的運(yùn)用也越來(lái)越多。
獸藥殘留
所謂獸藥殘留是指動(dòng)物產(chǎn)品的任何可食部分所含獸藥的母體化合物及，或其代謝物，以及與獸藥有關(guān)的雜質(zhì)的殘留。獸藥殘留既包括原藥也包括藥物在動(dòng)物體內(nèi)的代謝產(chǎn)物。主要的殘留獸藥有抗生素類(lèi)、磺胺藥類(lèi)、呋喃藥類(lèi)、抗球蟲(chóng)藥、激素藥類(lèi)和驅(qū)蟲(chóng)藥類(lèi)。獸藥通常是通過(guò)在預(yù)防和治療動(dòng)物疾病用藥、在飼料添加劑中使用以及在食品保鮮中引入藥物而帶來(lái)對(duì)食品的污染。人長(zhǎng)期攝入含獸藥的動(dòng)物性食品后，不但會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生毒性作用，出現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)，而且動(dòng)物體內(nèi)的耐藥菌株可傳播給人體，當(dāng)人體發(fā)生疾病時(shí)，就給臨床上感染性疾病的治療帶來(lái)一定的困難，延誤正常的治療。另外有些殘留物還具有致畸、致癌、致突變作用。
Verheijen利用膠體金標(biāo)記純化的抗鏈霉素單克隆抗體，對(duì)鏈霉素的檢測(cè)限為160ng/ml，檢測(cè)方便快速，不需要其他試劑和儀器，時(shí)間僅需lOmintl41。而使用膠體金免疫層析試紙條，在檢測(cè)蝦肉等組織試樣中殘留氯霉素(chloramphenicol，CAP)殘留時(shí)，靈敏度可達(dá)到 lng/ml，只需5～10min，并且與類(lèi)似物沒(méi)有交叉反應(yīng)。Yong Jin等也使用金標(biāo)法來(lái)檢測(cè)動(dòng)物血漿和牛奶中的新霉素殘留，其檢測(cè)限為10ng/mltl6J。鹽酸克倫特羅即β2受體興奮劑，俗稱(chēng)“瘦肉精”能增強(qiáng)脂解和減慢蛋白質(zhì)分解代謝，若在畜牧生產(chǎn)中使用，可明顯提高飼料轉(zhuǎn)化率和瘦肉率；但使用劑量過(guò)大，則會(huì)對(duì)動(dòng)物和人(間接)的肝臟、腎臟等器官產(chǎn)生嚴(yán)重的毒副作用。盡管歐盟于1996年禁止在畜牧生產(chǎn)中使用該藥(EC Direc． tive 96/22/EC)，我國(guó)農(nóng)業(yè)部也于1997年明令禁止，但國(guó)內(nèi)“瘦肉精”中毒事件時(shí)有發(fā)生。劉見(jiàn)使用金標(biāo)試紙法快速檢測(cè)檢測(cè)鹽酸克倫特羅，最小檢測(cè)量達(dá)到40ng/ml?，F(xiàn)在商品化的試紙條產(chǎn)品現(xiàn)在也比較成熟，比利時(shí)UCB Bio-products公司開(kāi)發(fā)的Tlhe Beta STAR檢測(cè)法就是將特定的β-內(nèi)酰胺受體固定在試紙條上，用膠體金有色微粒作為標(biāo)記物，5min內(nèi)可以檢測(cè)到青霉素和頭孢霉素殘留。而國(guó)內(nèi)的劉平在用生物電化學(xué)傳感器檢測(cè)牛奶中殘留的青霉素時(shí)，認(rèn)為使用納米金將有助于提高傳感器的檢測(cè)限。
動(dòng)物傳染病
動(dòng)物傳染病不但會(huì)影響動(dòng)物養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)，也對(duì)人類(lèi)健康構(gòu)成威脅，聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織已把預(yù)防和控制嚴(yán)重的動(dòng)物流行病作為其工作重點(diǎn)之一。蝦白斑病毒(white spot syndrome virus，WSSV)是阻礙蝦養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要因素，至今還沒(méi)有有效的藥物，所以及早檢測(cè)出病毒，顯得尤其重要。Wang Xiaojie等已成功研究了斑點(diǎn)免疫金滲濾法(DIGFA)t19~和金標(biāo)試紙法來(lái)檢測(cè)蝦白斑病毒，其中金標(biāo)試紙法的檢測(cè)限為1 μg/ml，而使用銀增強(qiáng)，可以達(dá)到0.01μg/ml。賴(lài)清金等使用金標(biāo)試紙條來(lái)檢測(cè)豬瘟病毒，10～15min就能檢出結(jié)果，并可根據(jù)檢測(cè)結(jié)果合理指導(dǎo)豬瘟免疫和建立適宜的免疫程序。禽流感病毒(AIV)是引起禽類(lèi)急性死亡的烈性、病毒性傳染病，而且能感染人，我國(guó)許多地區(qū)也先后報(bào)道有高致病性禽流感的發(fā)生，給養(yǎng)禽業(yè)造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失，也嚴(yán)重威脅了人類(lèi)的健康。劉永德等將兔抗禽流感H5、H9亞型病毒抗體純化后，分別與制備的膠體金研制成免疫金探針，用改良的滲濾法安全快速地檢測(cè)被檢材料中禽流感H5、H9亞型病毒，3min即可得到結(jié)果，檢測(cè)靈敏度分別為1.62ug/ml和1.25μg/ml。
農(nóng)藥殘留
農(nóng)藥殘留分析的困難包括：樣品基質(zhì)背景復(fù)雜、前處理過(guò)程繁瑣，需要耗費(fèi)較多的時(shí)間、被測(cè)成分濃度較低、分析儀器的定性能力受到限制、儀器檢測(cè)靈敏度不夠等一系列問(wèn)題，但使用金標(biāo)記的快速檢測(cè)可以很好的解決以上問(wèn)題。國(guó)內(nèi)的王朔分別使用納米金免疫層析和納米金滲濾法檢測(cè)西維因的殘留，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程只需5min，檢測(cè)限也分別達(dá)到100ug/L和50μg/L。國(guó)內(nèi)的生物技術(shù)公司也開(kāi)發(fā)出了成熟的商品化產(chǎn)品，如克百威農(nóng)殘速測(cè)試紙條等。
致病微生物檢測(cè)
目前基于金標(biāo)記的快速檢測(cè)研究在致病微生物方面比較多，檢測(cè)的種類(lèi)也比較多。最早Hasan以免疫磁性分離技術(shù)為基礎(chǔ)的免疫膠體金技術(shù)已成功應(yīng)用于01群霍亂弧菌(Vibriocholerae)的檢測(cè)。國(guó)內(nèi)洪幫興等人研究了以硝酸纖維膜為載體納米金顯色的寡核苷酸芯片技術(shù)，為在分子水平快速簡(jiǎn)便的鑒別致病菌提供了可能，甚至可以檢出致病菌的耐藥性變異。該芯片技術(shù)對(duì)大腸埃希氏菌、沙門(mén)氏菌、志賀氏菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌、變形桿菌、單核細(xì)胞增生李斯特菌、蠟樣芽孢桿菌、肉毒梭菌和空腸彎曲菌等10種(屬)具有高靈敏度和特異性，檢出水平可達(dá)10CFU/mlt251。殷涌光等在使用集成化手持式Spreeta TM SPR傳感器快速檢測(cè)大腸桿菌時(shí)，引入膠體金復(fù)合抗體作為二次抗體大幅度增加質(zhì)量，進(jìn)一步擴(kuò)大了檢測(cè)信號(hào)，同時(shí)延長(zhǎng)膠體金復(fù)合抗體與微生物的結(jié)合過(guò)程，使檢測(cè)信號(hào)進(jìn)一步穩(wěn)定與放大，從而顯著提高了檢測(cè)精度，使該傳感器對(duì)大腸桿菌的檢測(cè)精度由10.6 CFU/ml提高到10.1CFU/ml。金免疫滲濾法重要的食源性致病菌之一大腸埃希氏菌0157：H7，目前的檢測(cè)通常先以山梨醇麥康凱瓊脂(sMAC)進(jìn)行初篩，然后用生化和血清學(xué)試驗(yàn)做鑒定，一般需要24～48h，而采用膠體金免疫滲濾法檢測(cè)卻非常的簡(jiǎn)便，在很短時(shí)間即可得到結(jié)果。
在致病菌快速檢測(cè)中金標(biāo)試紙條的研究越來(lái)越廣泛。謝昭聰?shù)葢?yīng)用膠體金免疫層析法檢測(cè)水產(chǎn)品中霍亂弧菌的研究中，增菌液霍亂弧菌含量為1CFU/ml，通過(guò)增菌12h后，即可應(yīng)用膠體金免疫層析法診斷試劑檢出，而一般水產(chǎn)品霍亂弧菌檢測(cè)所采用的傳統(tǒng)常規(guī)方法，檢測(cè)時(shí)限長(zhǎng)，增菌培養(yǎng)需8～16h，分離培養(yǎng)需14～20h，初步報(bào)告需30h以上，實(shí)際操作中，需要3d以上才能出報(bào)告。腸桿菌科的大屬沙門(mén)氏菌可引起人的沙門(mén)氏菌性食物中毒，王中民等人采用免疫滲濾法可檢出85%的引起食物中毒的沙門(mén)氏菌，靈敏度為2.4×107CFU/ml，對(duì)最常見(jiàn)的鼠傷寒、豬霍亂和腸炎沙門(mén)氏菌，檢出率達(dá)100%，而采用膠體金免疫層析法的靈敏度為2.1×106CFU/mlt30j。被美國(guó)列為七種主要食源性致死病菌之一的李斯特菌，如果按照傳統(tǒng)的分離培養(yǎng)和鑒定技術(shù)需要l～2周時(shí)間，而采用免疫膠體金層析法只需10min就能得到檢測(cè)結(jié)果，靈敏度達(dá)到87.5%。
真菌毒素的檢測(cè)
真菌毒素(Mycotoxin)是由真菌(Fungi)產(chǎn)生的具有毒性的二級(jí)代謝產(chǎn)物，廣泛存在食品和飼料中，人類(lèi)若誤食受污染的食品，就會(huì)中毒或誘發(fā)一定疾病，甚至癌癥。檢測(cè)食品中的真菌毒素常用理化方法或生物學(xué)方法。但理化法需要較昂貴的儀器設(shè)備，操作復(fù)雜。而運(yùn)用免疫技術(shù)檢測(cè)真菌毒素敏感性高，特異性強(qiáng)，非常適用于食物樣品的檢測(cè)。D．J．Chiao等使用金標(biāo)免疫層析法在10min之內(nèi)即可檢測(cè)50ng/ml的肉毒桿菌毒素B(BoNT/B)，如果使用銀增強(qiáng)則其檢測(cè)限可以達(dá)到50pg/ml，而且對(duì)A、E型肉毒桿菌毒素沒(méi)有交叉反應(yīng)。貉曲霉毒素是曲霉屬和青霉屬產(chǎn)生的一類(lèi)真菌毒素，其中毒性最大、與人類(lèi)健康關(guān)系最密切、對(duì)農(nóng)作物的污染最重、分布最廣的是赭曲霉素A(OTA)，賴(lài)衛(wèi)華等研制的赭曲霉毒素A快速檢測(cè)膠體金試紙條，檢測(cè)限達(dá)到了10ng/mlt331，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于目前我國(guó)對(duì)赭曲霉毒素的限量要求5μg/L。黃曲霉毒素B z的快速檢測(cè)國(guó)內(nèi)也有很多研究，孫秀蘭研制的黃曲霉毒素B，金標(biāo)免疫試紙條，其最低檢測(cè)限達(dá)到2．5ng/ml，而且能定性或半定量檢測(cè)食品中的黃曲霉毒素B，含量。
小 結(jié)
隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，食品分析檢測(cè)技術(shù)也在不斷地更新、完善和迅速發(fā)展，尤其是快速檢測(cè)技術(shù)更能適應(yīng)現(xiàn)代高效、快速的節(jié)奏和滿足社會(huì)的要求。儀器分析法可以保證數(shù)據(jù)的精確性和準(zhǔn)確性，但其流程仍比較煩瑣。盡管以納米金為標(biāo)記物的免疫分析法及其它速測(cè)技術(shù)的開(kāi)發(fā)過(guò)程需投入較多資金和較長(zhǎng)時(shí)間，但具有簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、價(jià)廉、樣品所需量少等優(yōu)點(diǎn)，其靈敏度與常規(guī)的儀器分析一致，適合現(xiàn)場(chǎng)篩選，而且其中的金免疫層析技術(shù)正在向定量、半定量檢測(cè)和多元檢測(cè)的方向發(fā)展，更加體現(xiàn)出金標(biāo)技術(shù)的優(yōu)勢(shì)?？傊焖贆z測(cè)技術(shù)的快速、靈敏、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，使之在食品衛(wèi)生檢疫和環(huán)境檢測(cè)中有著廣泛的應(yīng)用價(jià)值和發(fā)展前景。
制備方法
配制濃度為2.44×10-3 mol/L 的HAuCl4·4H2O溶液、濃度為3.43×10-2 mol/L 的Na3C6H5O7·2H2O 溶液、濃度為1.00×10-4 mol/L 的 PVP 溶液, 以及濃度為0.391 mol/L 的NaBH4 溶液備用。在燒杯中加入10 mL 氯金酸溶液, 10 mL 或不加保護(hù)劑溶液, 80 mL 三蒸水, 將燒杯置于數(shù)顯測(cè)速恒溫磁力攪拌器上, 邊加熱邊攪拌, 攪拌的轉(zhuǎn)速設(shè)置為600 r/min, 加熱至75℃, 恒溫2 min, 用移液管移取一定體積的還原劑(Na3C6H5O7 或NaBH4)溶液，迅速一次加入到上述混合液, 開(kāi)始計(jì)時(shí), 使液體顏色恒定并持續(xù)加熱一段時(shí)間共9 min, 停止加熱, 繼續(xù)攪拌5 min 后, 停止攪拌, 冷卻至室溫, 所得液體為納米金溶膠。
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癲癇是指由腦部神經(jīng)元的過(guò)度放電引起的一種急性、反復(fù)發(fā)作、短暫性、重復(fù)性、刻板性的腦功能紊亂。癲癇發(fā)作是由腦部神經(jīng)元的過(guò)度放電引起的。分為特發(fā)性癲癇、癥狀性癲癇，隱源性癲癇，癥狀性癲癇最常見(jiàn)的病因有腦血管疾病、腦外傷、發(fā)育異常、感染、腫瘤和退行性病變、寄生蟲(chóng)等。癲癇發(fā)作表現(xiàn)為意識(shí)、運(yùn)動(dòng)、植物神經(jīng)和精神
巴勒斯坦地區(qū)（阿拉伯語(yǔ)： ??????? ?????????? ；希臘語(yǔ)：Παλαιστινιακ? εδ?φη ；希伯來(lái)語(yǔ)：?????? ??????????；拉丁語(yǔ)：Palestine）是西亞的一個(gè)地理區(qū)域，位于地中海與死海、約旦河之間，地處亞、非、歐三洲交通樞紐，具有重要的戰(zhàn)略意義。面積270
西班牙王國(guó)（西班牙語(yǔ)：Reino de Espa?a；英語(yǔ)：The Kingdom of Spain），簡(jiǎn)稱(chēng)“西班牙”，是主要位于歐洲西南部的君主立憲制國(guó)家。 截至2023年，西班牙總?cè)丝跒?761.5萬(wàn)，國(guó)土面積約為50.6萬(wàn)平方千米，海岸線長(zhǎng)約7800千米，領(lǐng)海面積為43332平方千米。西班牙的
乾隆是中國(guó)清朝第六位皇帝，其年號(hào)始于1736年（乾隆元年），至1796年（乾隆六十年），共六十年。乾隆年號(hào)是全中國(guó)范圍內(nèi)使用時(shí)間第二長(zhǎng)的年號(hào)，僅次于康熙。在1796年2月9日，乾隆帝將清朝皇位內(nèi)禪予嘉慶帝，自此全中國(guó)范圍內(nèi)改用嘉慶年號(hào)。但乾隆帝仍繼續(xù)執(zhí)掌朝政，北京紫禁城內(nèi)仍保留“乾隆”年號(hào)，直至嘉慶
尚可名片
這家伙太懶了，什么都沒(méi)寫(xiě)！
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