百科首頁 > 正文

可溶性蛋白質（篩選抗性的指標之一）

次瀏覽 | 更新時間：2023-05-23

來源：網(wǎng)絡整理

精選百科

本文由作者推薦

可溶性蛋白質

篩選抗性的指標之一

可溶性蛋白是重要的滲透調節(jié)物質和營養(yǎng)物質，他們的增加和積累能提高細胞的保水能力，對細胞的生命物質及生物膜起到保護作用，因此經(jīng)常用作篩選抗性的指標之一。

基本信息

中文名	可溶性蛋白質
外文名	Soluble protein
拼音	kerongxingdanbaizhi
特點	以小分子狀態(tài)溶于水或其他溶劑
應用	植物生理、微生物
實驗	考馬斯亮藍G-250法

收起

解釋

可溶性蛋白指可以以小分子狀態(tài)溶于水或其他溶劑的蛋白。通常在植物生理、微生物、食品加工等實驗中作為重要指標。如可溶性蛋白是植物抗旱性的重要指標之一。

測定

原理

考馬斯亮藍G－250(GooMAssIe BrIllIAnT Blue G－250)測定蛋白質含量屬于染料結合法的一種。考馬斯亮藍G－250在游離狀態(tài)下呈紅色，在稀酸溶液中，當它與蛋白質的疏水區(qū)結合后變?yōu)榍嗌?，前者最大光吸收?65nM，后者在595nM。在一定蛋白質濃度范圍內(1～100μg)，蛋白質與色素結合物在595nM波長下的光吸收與蛋白質含量成正比，故可用于蛋白質的定量測定。蛋白質與考馬斯亮藍G－250結合在2Min左右的時間內達到平衡，完成反應十分迅速，其結合物在室溫下1H內保持穩(wěn)定。該反應快速靈敏(靈敏度比FolIn－酚法還高4倍)、易于操作、干擾物質少(考馬斯亮藍G－250和蛋白質通過范德華力結合，受蛋白質的特異性影響較小，除組蛋白外，其他不同種類蛋白質染色強度差異不大)，可測定微克級蛋白質含量，是一種比較好的蛋白質定量法。但此方法也存在其缺點，考馬斯亮藍在蛋白質含量很高時線性關系偏低，且不同來源蛋白質與色素結合狀況有差異。

儀器與用具

721分光光度計；10Ml量筒1個；研缽；燒杯；量瓶；移液管：1Ml 3支，0?1Ml 3支；10Ml具塞刻度試管14支。

試劑

標準蛋白質溶液：用牛血清白蛋白配成含蛋白質100μg/Ml的標準蛋白溶液;

90%乙醇；

85%磷酸(W/V)；

考馬斯亮藍G－250溶液：稱取100μg考馬斯亮藍G－250，溶于50Ml 90%乙醇中，加入85%的磷酸100Ml，最后用蒸餾水定容到1000Ml，貯放在棕色瓶中，此溶液在常溫下可放置1個月。

操作方法

1?標準曲線(蛋白質含量為0～100μg/Ml)的繪制　取6支具塞試管，按表2－1數(shù)據(jù)配制含0～100μg/Ml的牛血清蛋白質液各1Ml。

表2－1不同蛋白質含量的牛血清蛋白質液配制表

管號123456蛋白質標準液（ml)00.200.400.600.801.00蒸餾水（ml)1.000.800.600.400.200蛋白質含量（μg）020406080100在每支試管中加入5Ml考馬斯亮藍G－250溶液，蓋塞，反轉混合數(shù)次，放置2Min后，用1CM光徑比色杯在595nM下比色。以蛋白質濃度為橫坐標，以吸光值為縱坐標繪制標準曲線。

2.樣品提取液中蛋白質濃度的測定　吸取樣品提取液1.0Ml(樣品提取見LoWry法)，放入具塞試管中(每個樣品設置兩個重復)，加入5Ml考馬斯亮藍G－250溶液，充分混合，放置2Min后在595nM下比色，記錄吸光值，并通過標準曲線查得蛋白質含量。

3.結果計算

樣品中蛋白質的含量(Mg/g)=C×VTV1×FW×1000（2-2）

式中C：查標準曲線值(μg)；VT：提取液總體積(Ml)；

FW：樣品鮮重(g)； V1：測定時加樣量(Ml)。

可溶性蛋白質相關的文章

野菊（菊屬多年生草本植物）

野菊（學名：Chrysanthemum indicum Linnaeus），又名山菊花、黃菊仔、菊花腦、瘧疾草，是菊科（Asteraceae）菊屬(Chrysanthemum)一種多年生草本植物。野菊分布較為廣泛，主要分布在印度、日本、朝鮮、韓國、中國，在中國主要分布在東北、華北、華中、華南及西南各

心肌缺血（心血管類供血供氧不足造成的病理生理狀態(tài)）

心肌缺血（myocardial ischemia）又稱為心臟缺血、缺血性心臟病，是一種心血管內心肌血流量不足引起的病理生理狀態(tài)。主要是因為供應心肌的冠狀動脈因粥樣硬化或其他原因而導致冠狀動脈血流完全或不完全阻塞，引起冠狀動脈供血不足，不能滿足心肌代謝需要，心肌消耗其糖原儲備進行無氧代謝。長期吸煙或接

法西斯（極端獨裁的表現(xiàn)形式）

法西斯，（拉丁語fasces的譯音）原指中間插著一把斧頭的“束棒”，為古羅馬執(zhí)法官吏的權力標志?，F(xiàn)象征強權、暴力、恐怖統(tǒng)治，對外侵略掠奪，是資本主義國家的極端獨裁表現(xiàn)形式。

庫車站（1998年建于新疆的三等站）

庫車站位于中國新疆維吾爾自治區(qū)阿克蘇地區(qū)，是中國鐵路烏魯木齊局集團有限公司管轄的三等站，建于1998年，建筑面積1818㎡。庫車站為庫車地區(qū)鐵路主要客貨運站，車站主要辦理銜接方向旅客列車的通過作業(yè)，以及庫車至阿克蘇、庫爾勒方向區(qū)段，摘掛列車的解編作業(yè)。

張騫出使西域（西漢的對外國策）

張騫出使西域，指的是漢武帝時期張騫兩次出使西域，開辟通往西域道路的歷史事件。

浙江（中華人民共和國省級行政區(qū)）

浙江本詞條是多義詞，共2個義項中華人民共和國省級行政區(qū)浙江省，簡稱“浙”，省會杭州。浙江省境內最大的河流錢塘江，因江流曲折，稱之江，又稱浙江，省以江名。其地處中國東南沿海長江三角洲南翼，東臨東海，南接福建，西與江西、安徽相連，北與上海、江蘇接壤。浙江地勢由西南向東北傾斜，地形復雜。山脈自西南向東北成大致平行的三支，有“七山一水兩分田”之說。浙江屬典型的亞熱帶季風氣候區(qū)。浙江是全國島嶼最多的省份，其