放射免疫技術是基于競爭性結合反應原理的放射免疫分析(RIA)。

基本介紹

放射免疫技術

一,原理及分類

二,常用的放射性核素

三,標記物制備及鑒定

四,抗血清鑒定

第二節(jié)放射免疫分析

一,基本原理

二,實驗方法及測定

第三節(jié)免疫放射分析

一,基本原理

二,IRMA與RIA的比較

思考題

小結

免疫技術:以抗原-抗體反應原理為基礎,對樣品中相應抗原或抗體進行檢測.

標記技術:將可被探測的示蹤物質用化學方法與化合物連接.

標記免疫分析:用可微量或超微量檢測的示蹤劑標記抗原,抗體,檢測免疫反應結果并確定待檢物.

標記免疫技術-基本概念

常見標記免疫技術

放射免疫技術

酶免疫技術

熒光免疫技術

第一節(jié)放射免疫技術

稍后又發(fā)展了非競爭性結合的免疫放射分析(IRMA).該類技術具有靈敏度高,特異性強,重復性好,樣品及試劑用量少,操作簡便且易于標準化等優(yōu)點,廣泛應用于生物醫(yī)學研究和臨床診斷領域中各種微量蛋白質,激素,小分子藥物和腫瘤標志物的定量分析,對相關學科的發(fā)展起到了極大地推動作用.

放射免疫

RIA

以標記抗原與反

應系統(tǒng)中未標記

抗原競爭結合特

異性抗體來測定

待檢樣品中抗原

量.

免疫放射

IRMA

以過量標記抗體

與抗原非競爭結

合,采用固相免

疫吸附載體分離

游離和結合標記

抗體.

放射受體分析

RRA

放射配體結合

分析RBA

其它

一,放射免疫技術-原理及分類

二,放射免疫技術-常用的放射性核素

125I3H

射線γβ

理化性活潑差

核素豐度>90%-

半衰期60.2d12.3y

標記方法簡單復雜

標記設備低廉昂貴

測量條件簡單復雜

常用標記核素

125碘-標記物的制備-標記

125I-

化學或酶促反應,將

放射性負電碘離子氧

化成碘原子或正電碘

離子,通過取代反應

置換被標記物分子中

酪氨酸或酪胺殘基以

及組胺殘基上的氫原

子.

125I或125I+

125I-標記物

(混合物)

Ch-T,LPO氧化

取代反應

直接標記法

三,放射免疫技術-標記物制備及鑒定

使用無還原劑的高比放射性碘源

被標記物用量要少

ch-T用量要低

控制總反應體積