正文

熒光偏振免疫分析法(fluorescence polarization immunoassay，F(xiàn)PIA)是一種定量免疫分析技術(shù)，偏振熒光的強(qiáng)弱程度與熒光分子的大小呈正相關(guān)，與其受激發(fā)時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)的速度呈反相關(guān)。FPIA最適宜檢測(cè)小至中等分子物質(zhì)，常用于藥物、激素的測(cè)定。

熒光偏振免疫分析常用于測(cè)定半抗原的藥物濃度。反應(yīng)系統(tǒng)內(nèi)除待測(cè)抗原外，同時(shí)加入一定量用熒光素標(biāo)記的小分子抗原，使二者與有限量的特異性大分子抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。當(dāng)待測(cè)抗原濃度高時(shí)，經(jīng)過(guò)競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)，大部分抗體被其結(jié)合，而熒光素標(biāo)記的抗原多呈游離的小分子狀態(tài)。由于其分子小，在液相中轉(zhuǎn)動(dòng)速度較快，測(cè)量到的熒光偏振程度也較低。反之，如果待測(cè)抗原濃度低時(shí)，大部分熒光素標(biāo)記抗原與抗體結(jié)合，形成大分子的抗原抗體復(fù)合物，此時(shí)檢測(cè)到的熒光偏振程度也較高。熒光偏振程度與待測(cè)抗原濃度呈反比關(guān)系。我們測(cè)定待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)品后制標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過(guò)檢測(cè)反應(yīng)系中偏振光的大小，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上就可以精確地得知樣品中待測(cè)抗原的相應(yīng)含量。